İki enantiyomerin ayrılması zor olabilir çünkü düzlem polarize ışıkla etkileşimleri (optik aktivite) dışında aynı fiziksel ve kimyasal özelliklere sahiptirler. Enantiyomerleri ayırmanın etkili bir yöntemi kiral kromatografidir. Bu teknik, stereokimyalarına bağlı olarak her enantiyomerle farklı şekilde etkileşime giren bir kiral seçici içeren sabit bir faz kullanır. Enantiyomerler kromatografik kolondan geçerken seçici olarak tutulur veya farklı oranlarda elüe edilir, böylece kiralitelerine göre etkili bir şekilde ayrılırlar.
İki enantiyomerin ayrı örnekleri arasında ayrım yapmak için yaygın bir yaklaşım, bunların optik aktivitesini bir polarimetre kullanarak analiz etmektir. Enantiyomerler düzlem polarize ışığı eşit fakat zıt yönlerde döndürür, böylece her numunenin spesifik dönüşünün ölçülmesi numunenin kimliğini ve saflığını doğrulayabilir. Bu yöntem, dönme açısının hassas ölçümüne ve her enantiyomer için bilinen standartlarla veya teorik değerlerle karşılaştırılmasına dayanır.
Enantiyomerleri ayırmak için bilinen yöntemlerden biri, kiral sabit faz kullanan yüksek performanslı sıvı kromatografisidir (HPLC). HPLC’de numune karışımı, stereokimyasal farklılıklarına bağlı olarak bir enantiyomerle diğeri üzerinde seçici olarak etkileşime giren kiral sabit fazla doldurulmuş bir kolondan geçirilir. Bu, daha sonra daha fazla analiz edilebilecek veya belirli uygulamalar için toplanabilecek enantiyomerlerin etkili bir şekilde ayrılmasına olanak tanır.
Enantiyomerleri ayırmak için özellikle yüksek performanslı sıvı kromatografisi (HPLC) veya gaz kromatografisi (GC) gibi teknikleri kullanan kiral kromatografi yaygın olarak kullanılır. Kiral kromatografi, kiralitelerine bağlı olarak enantiyomerlerle seçici olarak etkileşime giren kiral seçicileri içeren sabit bir faz kullanır. Bu etkileşim, enantiyomerler için farklı alıkonma süreleri veya elüsyon sıraları ile sonuçlanır ve bunların stereokimyasal farklılıklarına dayalı olarak ayrılmasını kolaylaştırır.
Enantiyomerleri ayırmak için özel olarak tasarlanmış bir laboratuvar tekniği kiral kromatografidir. Bu yöntem, yüksek performanslı sıvı kromatografisinde (HPLC) veya gaz kromatografisinde (GC) kiral kolonlar gibi kiral seçiciler içeren sabit bir faz kullanır. Bu seçiciler, stereokimyalarına dayalı olarak her bir enantiyomerle farklı şekilde etkileşime girer ve farklı bağlanma afinitelerinden veya etkileşimlerinden yararlanarak bunların ayrılmasını sağlar. Kiral kromatografi, farmasötik, kimyasal ve biyolojik araştırmalarda çeşitli uygulamalar için enantiyomerleri izole etmek ve incelemek amacıyla yaygın olarak kullanılmaktadır.